一、原理
果汁中的有機酸,用氫氧化鈉標準溶液滴定,以酸度計測定終點,用消耗的氫氧化鈉標準溶液的體積計算總酸量。又根據氨基酸為兩性電解質,氨基酸分子中既含有羧基,又含有氨基,加入甲醛以固定氨基,使溶液顯示酸性,再用氫氧化鈉標準溶液滴定以酸度計測定終點,根據加入甲醛后氫氧化鈉標準溶液的消耗量計算出氨基態氮的含量。
二、儀器設備
(1)酸度計(附磁力攪拌器);(2)玻璃復合電極;(3)電子分析天平,最小稱量是0.1mg;(4)滴定管5ml。
三、試劑
(1)所有試劑均使用分析純;分析用水應符合GB/T6682規定的二級水規格或蒸餾水,使用前應經煮沸、冷卻;
(2)0.1 mol/L氫氧化鈉標準溶液,按GB/T601配制與標定;
(3)0.01mol/L氫氧化鈉標準溶液(臨用現配);
(4)0.05mol/L氫氧化鈉標準溶液(臨用現配);
(5)中性甲醛溶液:在使用前1 h根據中性甲醛溶液的需用量,將甲醛用氫氧化鈉溶液調到pH8.4;
(6)pH6.86和pH9.18緩沖溶液。
四、分析步驟
酸度計接通電源,預熱30min后,用pH6.86,和pH9.18的緩沖溶液(3.6)校正酸度計。稱取混合均勻的果汁2~5g于250ml燒杯中加40~60ml蒸餾水將燒杯置于電磁攪拌器上,插入電極。開動攪拌器,用0.1mol/L氫氧化鈉標準溶液慢慢中和試樣中的有機酸,如樣品酸度低,用0.01mol/L(或0.05mol/L)氫氧化鈉標準溶液滴定,隨時觀察溶液pH的變化,接近滴定終點時放慢滴定速度,一次滴加半滴(最多一滴),直到酸度計指示pH8.2,即達到滴定終點。記錄消耗0.1mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的體積數值(V1)。
將燒杯中的混合液繼續滴定到pH8.4,并保持1min不變。然后準確加入10ml中性甲醛溶液(3.5),再用0.1mol/L(或0.05mol/L)氫氧化鈉標準溶液滴到pH8.4。記錄加入中性甲醛溶液后消耗0.1mol/L(或0.05mol/L)氫氧化鈉標準溶液的體積數值(V2)。同一被測樣品應同時測定2次。
空白試驗:用水代替試樣,按以上步驟操作,記錄酸度計顯示pH8.2時的體積數V01,和加入中性甲醛后,酸度計顯示pH8.4后所消耗的體積V02。
五、計算結果
(1)果汁中總酸的含量,按×100計算,式中 X— 果汁中總酸的含量 (g/100g或g/100ml);V1—樣品滴定消耗氫氧化鈉標準溶液的體積,ml;V01—空白試驗消耗氫氧化鈉標準溶液的體積(ml);C—氫氧化鈉標準溶液的濃度(mol/L);m—樣品的質量(g或ml;K—換算果汁中適當酸的系數:蘋果酸0.067、檸檬酸0.064、酒石酸0.075。允許差:同一樣品同時或連續2次測定結果的相對誤差≤±5%,取平均值作為結果,精確到小數點后2位。
(2)果汁中氨基態氮含量,按計算,試中X—果汁中氨基態氮的含量(mg/100g或g/100ml);V2—加入中性甲醛溶液后,滴定試樣消耗0.05mol/L氫氧化鈉標準溶液的體積(ml);V02—空白試驗消耗0.05 mol/L氫氧化鈉標準溶液的體積(ml);m—樣品的質量(g或ml);C—氫氧化鈉標準溶液的濃度(mol/L);14—與1ml氫氧化鈉標準溶液[C(NaOH)=1.000mol/L]相當的氮的質量(mg)。允許差:同一樣品同時或連續2次測定結果的相對誤差:氨基態氮≥10mg/100g,≤±2%;氨基態氮<10mg/100g,≤±5%。取2次測定的算術平均值作為結果,精確到小數點后1位。