壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的，是熱力滅菌中使用最普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng)，滅菌效果可靠，能殺滅所有微生物。

1、高壓蒸汽滅菌法的注意事項(xiàng)

第一，無菌包不宜過大（小于50cm×30cm×30cm），不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對(duì)流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時(shí)使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。

第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹中央，嚴(yán)重影響滅菌效果。

第三，定期檢查滅菌效果。經(jīng)高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。

2、高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)

有以下三種方法：

第一種是工藝監(jiān)測(cè)，又稱程序監(jiān)測(cè)。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器（壓力表、溫度表、計(jì)時(shí)表）、圖表、指示針、報(bào)警器等，指示滅菌設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測(cè)方法，每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行

第二種是化學(xué)指示監(jiān)測(cè)。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間條件下受熱變色或變形的特點(diǎn)，以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù)。常用的有：

自制測(cè)溫管：將某些化學(xué)藥物的晶體密封于小玻璃管內(nèi)（長2cm,內(nèi)徑1~2mm）制成。常用試劑有苯甲酸（熔點(diǎn)121-123℃）等。滅菌時(shí)，當(dāng)濕度上升至藥物的熔點(diǎn)，管內(nèi)的晶體即熔化，事后，雖冷卻再凝固，其外形仍可與未熔化的晶體相區(qū)別，此法只能指示溫度，不能指示熱持續(xù)時(shí)間是否已達(dá)標(biāo)，因此是最低標(biāo)準(zhǔn)。主要用于各物品包裝的中心情況的監(jiān)測(cè)。

M壓力滅菌指示膠帶：此膠帶上印有斜形白色指示線條圖案，是一種貼在待滅菌的無菌包外的特制變色膠紙。其粘貼面可牢固地封閉敷料包、金屬盒或玻璃物品，在121℃經(jīng)20分鐘，130℃經(jīng)4分鐘后，膠帶100%變色（條紋圖案即顯現(xiàn)黑色斜條）。3M膠帶既可用于物品包裝表面情況的監(jiān)測(cè)，又可用于對(duì)包裝中心情況的監(jiān)測(cè)，還可以代替別針，夾子或帶子使用。

第三種是生物指示劑監(jiān)測(cè)。利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌，以測(cè)定熱力滅菌的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，本菌芽胞對(duì)熱的抗力較強(qiáng)，其熱死亡時(shí)間與病原微生物中抗力最強(qiáng)的肉毒桿菌芽胞相似。生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，每個(gè)包中心部位置生物指示劑2個(gè)，放在滅菌柜室的5個(gè)點(diǎn)，即上、中層的中央各一個(gè)點(diǎn)，下層的前、中、后各一個(gè)點(diǎn)。滅菌后，取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置55-60℃溫箱中培養(yǎng)48小時(shí)至7天，觀察最終結(jié)果。若培養(yǎng)后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅。達(dá)到了滅菌要求。若變?yōu)辄S色混濁，說芽胞未被殺滅，滅菌失敗。