吡拉西坦葡萄糖注射液是國家四類新藥，為腦代謝改善藥，用于腦動脈硬化癥及腦血管意外所致的記憶和思維功能減退的治療。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀；紫外多波長檢測器、自動進樣器、柱溫箱、四元泵、真空脫氣機，超聲波清洗器，石英亞沸高純水蒸餾器，乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，吡拉西坦注射葡萄糖液。

2 實驗方法

2.1 色譜條件 

色譜柱：ODS柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動相：水；流速：1.3ml／min；紫外檢測波長：220nm；柱溫：25℃；進樣量：2Oμl。

2.2 流動相的選擇和最佳檢測波長的選擇

 (1)流動相的選擇：曾選用甲醇-乙腈-水、甲醇-水等分離吡拉西坦，但主峰的保留時間較短，對主要降解產物5-羥甲基糠醛進行檢測，發現與主峰分離不完全，影響主藥含量測定，故改用水作流動相進行檢測，在此條件下，5-羥甲基糠醛保留時間約在2min，而主藥的保留時間約在11min 并對專屬性進行考察，破壞試驗的降解產物保留時間均不影響主藥的含量測定。雜質峰可得到較好地分離和檢測。

(2)檢測波長的選擇：吡拉西坦在含量測定濃度下，在2OO～400nm 的紫外掃描圖顯示，其在220.5nm處有最大吸收，故選擇220nm。

2.3 輔料影響試驗 

精密稱取葡萄糖5.0g置100ml量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，制成與吡拉西坦葡萄糖注射葡萄糖濃度相當的溶液；取此溶液1ml置250ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取2Oμl注入液相色譜儀，記錄HPLC檢測圖譜，結果表明：在選定的液相色譜條件下處方量的葡萄糖對測定無干擾。

2.4 專屬性試驗 

(1)高溫破壞；分別稱取吡拉西坦原料160mg 2份于5Oml量瓶中，1份在120℃烘烤2.5h，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，進行HPLC檢測；主要降解產物保留時間約為2.0 min。另1份加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，在6O℃加熱4 h，進行HPLC檢測，主要降解產物保留時間約為2.0min，檢測結果降解產物與主藥分離較好，互不干擾測定。

(2)酸破壞：稱取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加0.1mol／LHCL溶液1ml，溶解，在60℃加熱2h，加水稀釋至刻度，搖勻，進行HPLC檢測，主要降解產物的保留時間約為4.2min，檢測結果降解產物與主藥分離較好，互不干擾測定。

(3)堿破壞：稱取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中．加0.1mol／1Na0H溶液1ml，溶解，在6O℃加熱2 h，加水稀釋至刻度，搖勻。進行HPLC檢測。主要降解產物的保留時間約為2.1min和2.4 min，檢測結果降解產物與主藥分離較好．互不干擾測定。

(4)氧化破壞：稱取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加3O%H2O2溶液0.1ml，溶解，在60℃加熱0.5h，加水稀釋至刻度，搖勻，進行HPLC檢測，主要降解產物的保留時間約為2.0min和2.4min，檢測結果降解產物與主藥分離較好，互不干擾測定，并說明吡拉西坦極易被氧化。

2.5 測定方法回收率試驗 

取乙酰胺毗咯烷酮對照品約26、32、38mg，精密稱定，分置于1Oml量瓶中，并按處方比加入葡萄糖，用水溶解，稀釋至刻度，搖勻。精密量取1ml置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為樣品溶液，濃度分別為26μg／ml、32μg／ml、38μg／ml；另精密稱取乙酰胺吡咯烷酮對照品適量，用水配制成濃度為32μg／ml的對照溶液。分別精密吸取上述樣品溶液和對照溶液2Oμl。注入色譜儀，記錄峰面積，計算回收率。結果表明在99.9～100.1之間，并且RSD值均小于0.5 。

2.6 樣品的有關物質測定 

精密量取本品1ml置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液；精密移取1ml置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。精密量取對照溶液2Oμl注入液相色譜儀進行預試，調整檢測靈敏度，使主成分色譜峰達滿標的1O％～2O％；再精密量取供試液2Oμl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時間的2倍，計算各雜質峰面積的和，不得大于對照峰面積(1％)。