一、原理

    二氧化硫被四氯汞鈉吸收液吸收后，生成穩定的絡合物，再與甲醛和鹽酸副玫瑰苯胺作用，并經分子重排后，生成紫紅色的絡合物。顏色的深淺與二氧化硫的濃度成正比，可以比色測定。

二、儀器及試劑

儀器：分光光度計

（1）四氯汞鈉吸收液：稱取氯化汞（HgCl₂）27.2，氯化鈉11.7克，溶于水中并稀釋至1000毫升，放置過夜，過濾后使用。

（2）顯色劑：融解鹽酸福玫瑰苯胺100毫克于200毫升水中，加40毫升濃鹽酸，定容至500毫升，置于棕色瓶中。

（3）2％甲醛溶液：吸取37-40％甲醛5毫升于水中，并稀釋至100毫升。

（4）1％淀粉指示劑。

(5) 冰醋酸。

(6) 蛋白質沉淀劑。

a)飽和硼砂溶液：溶解約25克硼砂于500毫升水中．

b)硫酸鋅溶液溶解150克硫酸鋅于500毫升水中。

 (7)0.1N碘溶液。

 (8)0.1N硫氏硫酸鈉標準溶液。

 (9) 二氧化硫標準溶液：稱取0.5克亞硫酸氫鈉溶于200毫升四氯汞鈉吸收液中，放置過夜。上清液用定量濾紙過濾備用，按下法進行標定。

取10毫升亞硫酸氫鈉四氯汞鈉溶液于250毫升碘價瓶中，加水100毫升，加入0.1N碘溶液20毫升，冰醋酸5毫升，搖勻，用0.1N硫代硫酸鈉溶液滴定到淡黃色，加入1％淀粉指示劑5-6滴，繼續滴定至無色。空白試驗于250毫升碘價瓶中加A300毫升水，按上述步驟同樣操作。

SO₂(毫克/毫升)＝(V₁-V₂)/10×N×32.03

V₁；空白消耗硫代硫酸鈉標準溶液的量(m1)

V₂：標準消耗硫代硫酸鈉標準溶液的量(m1)

N：硫代硫酸鈉標準溶液的當量濃度

三、操作方法

 (1) 樣品處理：稱取經搗碎蘑菇樣品20克，加入飽和硼砂溶液5毫升，硫酸鋅2毫升，攪拌均勻，移入100毫升容量瓶中，加水至刻度。過濾，濾液供測定用(濾液必須澄清，否則要重復過濾數次)。

 (2) 標準曲線的繪制：吸取每毫升相當于2微克的二氧化硫標準溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升于25毫升比色管中，各加入2％甲醛溶液1毫升，顯色劑1毫升，另分別依次加入10、9、8、7、6、5毫升吸收液，混勻，靜置15分鐘，于分光光度計580毫微米波長下測定

 (3) 樣品分析：吸取濾液5毫升，加人吸收劑5毫升，2％甲醛溶液1毫升，顯色劑1毫升，混勻，靜置15分鐘，于分光光度計580毫微米波長下測定光密度。根據測得的光密度，從標準曲線查得相應的二氧化硫的含量。

四、計算               

S02：(毫克／公斤)＝C/W×1000

C；相當于標準的量(毫克)。

W：測定時所取樣品溶液相當于樣品的量(克)。

五、注意事項

 (1)最適反應為20-25℃，溫度低靈敏度低，故標準管與樣品管需在相同溫度下顯色。

 (2)溫度為15-16℃，放置時間需延長為25分鐘，顏色穩定20分鐘。

 (3)鹽酸副玫瑰苯胺中的鹽酸用量對顯色有影響，加人鹽酸量多，顯色淺，加入量少，顯色深，所以要按操作進行。

 (4) 甲醛濃度在0.15-0.25％時，顏色穩定，故選擇0.2％甲醛溶液。

 (5) 顏色較深的樣品，可用l0％活性炭脫色。

 (6) 測定粉絲，粉條中的二氧化硫時，樣品要浸泡30分鐘。

 (7) 樣品加入四氯汞鈉吸收液于100毫升容量瓶中，加水至刻度，搖勻。此溶液中的二氧化硫含量在24小時之內很穩定。