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分光光度計的應用、組成和原理

時間:2015-11-10 11:01:45      閱讀:10163

分光光度計是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,它是現代實驗室內檢測用的常規儀器。

一、分光光度計的應用

分光光度計常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

在印染方面,可以用分光光度計測量染色時燃料的上染百分率,以及整理在織的衣物上助劑的濃度,還可以用于顏色的測量。

同時它還廣泛的應用于食品檢測、農藥的檢測以及工業上石油的檢測等。  

二、分光光度計的組成  

各種型號的可見分光光度計,就其基本結構來說,都是由五個部分組成的,即光源、單色器、洗手池、檢測器以及信號指示系統。

三、分光光度計的基本原理  

基于物質對不同波長的光的選擇性吸收,不同的物質都有各自的吸收光譜,當光經色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光就會被溶液吸收。根據朗伯-比爾定律,當一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時,光強的減小程度和入射光的強度,溶液的濃度以及所透過溶液的長度成正比,其公式為:

T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc  

其中:T:透色比 I0:入射光強 A:吸光度 I:頭色光強度 K:吸收系數,1/mol/com b:液層厚,cm C:溶液的濃度,mol/l  

光的吸收定律不僅適用于有色溶液,也適用于無色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系,不僅適用于可見光的單色光,也適用于紫外和紅外光區的單色光,但應注意,此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過大時,透光性質發生變化,從容使溶液對光的吸收度與溶液濃度不成正比關系,波長交寬的混合光影響光的互補吸收,也會使測定產生誤差。


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