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可見分光光度計的工作原理

時間:2015-11-21 9:49:23      閱讀:2328

一、可見分光光度計

可見分光光度計(又名可見光度計、分光光度計)是可見光分光光度法能夠進行定量測量(標準曲線測量,可對物質進行濃度直讀);OD值直接測量(吸光度、透過率和能量等直讀);動力學測試(測出物質濃度隨時間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對某一種物質進行全波段掃描,分析物質的特征波長,判斷實驗過程的誤差);多波長測試(可以對物質同時進行多個波長的測試,分析物質的相關特性);還有可以進行DNA/蛋白質測試、總磷總氮測試、重金屬測試、農藥殘留測試、食品安全檢測、熱力發電金屬離子測試等等。

廣泛應用于食品、藥品、電力、生物研究、教學科研、化學化工、質量監督、水質環保和商檢等各大領域。

二、可見分光光度計原理

基于物質對不同波長的光的選擇性吸收,不同的物質都有各自的吸收光譜,當光經色散后的光譜通過某一溶液時,其中某些波長的光就會被溶液吸收。根據朗伯-比爾定律,當一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時,光強的減小程度和入射光的強度,溶液的濃度以及所透過溶液的長度成正比,其公式為:

T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc  

其中:T:透色比 I0:入射光強 A:吸光度 I:頭色光強度 K:吸收系數,1/mol/com b:液層厚,cm C:溶液的濃度,mol/l  

光的吸收定律不僅適用于有色溶液,也適用于無色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系,不僅適用于可見光的單色光,也適用于紫外和紅外光區的單色光,但應注意,此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過大時,透光性質發生變化,從容使溶液對光的吸收度與溶液濃度不成正比關系,波長交寬的混合光影響光的互補吸收,也會使測定產生誤差。

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