概述

咸魚（以下統(tǒng)一稱為魚干）是腌制品中的一種，早在2004年的時候就曝光過黑心的商人為防腐、防蠅在腌制品上使用農(nóng)藥，迄今為止依然有這樣的新聞報道。本文主要說明咸魚農(nóng)殘檢測方法。

一、實驗準(zhǔn)備

1.1儀器

液相色譜-三重四級捍質(zhì)譜儀，搖床、勻漿機，攪拌機，高速冷凍離心機，氮吹儀，十分之一電子天平，蒸發(fā)皿/旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，水浴鍋

1.2試劑

甲酸、乙腈均均為色譜純；乙腈、丙酮、二氯甲烷、硫酸鈉等均為分析純，實驗用水為屈臣氏；甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、久效磷、敵百蟲、樂果、敵敵畏、殺撲磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)品，濃度為100mg/L

1.3質(zhì)譜條件

電離方式：ESI+，檢測模式：多反應(yīng)檢測（MRM)，毛細(xì)管電壓:4000V,干燥氣流重 10L/min,干燥氣溫度：3501C，霧化器壓力50psi 

二、實驗過程

    本次實驗的樣品是市場買回來的魚干，采用quechers前處理方法，魚干中魚油比較多，所以quechers里的配料必須選擇去油脂的。QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe），是近年來國際上最新發(fā)展起來的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測的快速樣品前處理技術(shù)。

1.樣品制備，去頭，去中間魚骨，剩下的魚肉攪拌機打碎。

2.稱取樣品5g，總共做8個樣品。

3.加標(biāo)

準(zhǔn)備好所需物品（冰凍的色譜純乙腈、勻漿機、一個裝干凈水的大燒杯、一個裝分析乙腈的小燒杯、陶瓷顆粒、移液槍、紙巾等）

3.1加入10cc的色譜純乙腈，勻漿機勻漿

勻漿后，先用大燒杯的水清洗刀頭，紙巾擦干

再用小燒杯的乙腈清洗刀頭（防止加標(biāo)樣品交叉污染并且可以洗滌刀頭中的油脂）

3.2放入陶瓷顆粒，加入分析鹽包（主要成分MgSO4、NaCl、檸檬酸鈉、三水合爾檸檬酸二鈉），陶瓷顆粒的是有混勻的作用，使用冰凍的乙腈，因為加入MgSO4的時候試管會發(fā)熱，

加入后立馬蓋上蓋子劇烈的搖晃使魚肉和萃取粉末充分混勻。

4.搖晃結(jié)束后高速冷凍離心

10000rmp/min，離心5min，然后把液體全部轉(zhuǎn)移到萃取的小離心管中

萃取試管的成分是：PSA、C18、Na2SO4（主要去除急性有機鹽、糖類、脂類等）

萃取試管里同樣要放入小陶瓷顆粒，大試管中的液體轉(zhuǎn)移到小試管以后同樣要劇烈的搖晃試管

最后高速冷凍離心，10000rmp/min，離心5min

5.最后高速冷凍離心

10000rmp/min，離心5min，吸取0.2ml定容到1ml上機檢測

A：稱取5g的魚干后，加入標(biāo)準(zhǔn)品，加入20ml的丙酮，本來標(biāo)準(zhǔn)要求是用振蕩器真的半小時的，這次我用勻漿來代替震蕩。

勻漿前準(zhǔn)備好一個裝水的大燒杯，和一個裝乙腈的小燒杯

B:勻漿后，標(biāo)準(zhǔn)要求是過濾的，這次用離心來代替過濾。吸取10ml到分液漏斗中！

C：加入事先準(zhǔn)備好的硫酸鈉溶液（20g/L）一加入后，分液漏斗里立馬變成奶白色了。

D:量筒量取20ml二氯甲烷加入分液漏斗中的，然后搖勻，靜制分層后，用一裝有2g無水硫酸鈉和5g中性氧化鋁的錐形瓶收集下層澄清液。再多次加入二氯甲烷重復(fù)以上步驟。

E:雞心瓶上放濾紙，把錐形瓶的上清液倒入雞心瓶中，然后用二氯甲烷清洗錐形瓶

（本來標(biāo)準(zhǔn)要求用蒸發(fā)皿蒸干，現(xiàn)在改用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀）

6.水浴鍋不設(shè)任何溫度下旋蒸至干

之前試過在40℃下旋干后回收率十分不理想，只有三種藥有回收率

7.旋蒸干以后還是發(fā)現(xiàn)上面有油脂，用2.5ml的流動相定容

8.高速冷凍離心機10000rmp/min在4℃條件下離心5min,倒入樣品瓶中，上機

三、結(jié)果與分析

3.1色譜條件的選擇

3.2線性范圍和相關(guān)系數(shù)

3.3回收率和精密度

3.4結(jié)語

（內(nèi)容來源儀器信息網(wǎng)）