國(guó)標(biāo)GB1886.235—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 檸檬酸》代替GB1987—2007《食品添加劑 檸檬酸》，從2007-1-1開(kāi)始實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以淀粉質(zhì)或糖質(zhì)原料經(jīng)發(fā)酵制得的食品添加劑檸檬酸。
本文主要介紹國(guó)標(biāo)中關(guān)于食品添加劑檸檬酸的檢驗(yàn)方法。
一、技術(shù)要求
首先國(guó)標(biāo)中對(duì)檸檬酸的技術(shù)要求，分為感官要求和理化指標(biāo)兩種。
感官要求應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。
理化指標(biāo)應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。
二、檢驗(yàn)方法
1 安全提示
本標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)方法中使用的部分試劑具有毒性或者腐蝕性, 操作時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)陌踩头雷o(hù)措施。
2 一般規(guī)定
本標(biāo)準(zhǔn)除另有規(guī)定外, 所用試劑的純度應(yīng)為分析純, 所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、 雜質(zhì)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、 制劑及制品, 應(yīng)按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備,試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中三級(jí)水的規(guī)定。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí), 均指水溶液。
3 鑒別試驗(yàn)
3. 1 試劑和材料
3. 1. 1 乙醇。
3. 1. 2 乙醚。
3. 1. 3 硫酸溶液:量取硫酸 2 9m L , 緩緩注入約 7 0 0m L 水中,冷卻, 稀釋至1000mL 。
3. 1. 4 硫酸汞溶液:稱取氧化汞5g,加水40mL,緩緩加入硫酸20m L , 邊加邊攪拌, 再加水40mL攪拌使之溶解。
3. 1. 5 高錳酸鉀溶液: c (1/5 KMnO4) =0. 1mol/ L 。
3. 1. 6 氫氧化鈉溶液: 5 0g / L 。
3. 1. 7 吡啶- 乙酸酐溶液: 將吡啶和乙酸酐按 3∶1 體積比混合。
3. 2 分析步驟
3. 2. 1 試樣易溶于水, 溶于乙醇,微溶于乙醚。
3. 2. 2 取適量試樣于 2 5m L 坩堝內(nèi), 熾灼,即緩緩分解, 但不得發(fā)生焦糖臭。
3. 2. 3 稱取試樣 5 0m g , 用水溶解后稀釋至 1 0m L 。吸取2m L 于 2 5m L 比色管中, 用氫氧化鈉溶液調(diào)至中性, 加硫酸溶液 1 滴,加熱至沸, 再加高錳酸鉀溶液 1 滴, 搖勻,紫色即消褪; 再加入硫酸汞溶液1 滴, 產(chǎn)生白色沉淀。
3. 2. 4 稱取試樣 5m g 于 2 5m L 比色管中,加吡啶 - 乙酸酐溶液約 5m L , 振搖, 即生成黃色到紅色或
紫紅色的溶液。
4 檸檬酸含量的測(cè)定
4. 1 方法提要
在水介質(zhì)中, 以酚酞作指示液, 采用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定檸檬酸溶液, 根據(jù)消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的量計(jì)算檸檬酸的含量。
4. 2 試劑和材料
4. 2. 1 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液: c ( N a OH ) =0. 5m o l/ L 。
4. 2. 2 酚酞指示液:1 0g / L 。
4. 2. 3 無(wú)二氧化碳的水。
4. 3 分析步驟
稱取試樣 1g , 需精確至0.0001g , 使用萬(wàn)分之一電子天平，置于 1 5 0m L 錐形瓶?jī)?nèi),加入無(wú)二氧化碳的水 5 0m L 溶解, 加酚酞指示液 3 滴, 用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至粉紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。
4. 4 結(jié)果計(jì)算
一水檸檬酸中檸檬酸含量( 以無(wú)水檸檬酸計(jì)) 的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w 1
無(wú)水檸檬酸中檸檬酸含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù) w 2
式中:V 1— — —試樣滴定所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積, 單位為毫升(m L ) ;
V 0— — —空白滴定所耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積, 單位為毫升(m L ) ;
c— — —?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度, 單位為摩爾每升( m o l / L ) ;
0. 0 6 40 4 — — —與1. 0 0m L 氫氧化鈉[ c ( N a OH ) =1. 0 0 0m o l/ L ]相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜臒o(wú)水檸檬酸的克數(shù);
m— — —試樣質(zhì)量, 單位為克(g) ;
0. 0 8 57 0 — — —一水檸檬酸中水的理論含量, 即 1 8. 0 1 / 2 1 0. 1 4=0. 0 8 57 0。
試驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn), 保留1 位小數(shù)。
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的 0.2% 。
5 水分的測(cè)定
按G B5 0 0 9.3 使用卡爾費(fèi)休水分儀用卡爾·費(fèi)休法測(cè)定。其中稱樣量一水檸檬酸 0. 1g 、 無(wú)水檸檬酸取 1g ; 無(wú)水甲醇2 0m L 。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果, 無(wú)水檸檬酸的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的 5% ; 一水檸檬酸的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的 2% 。
6 易炭化物的測(cè)定
6. 1 試劑和材料
6. 1. 1 鹽酸溶液:吸取鹽酸 2 4m L , 稀釋至 10 0 0m L 。
6. 1. 2 硫酸溶液:c (12 H2 S O 4 ) =1m o l/ L 。
6. 1. 3 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液: c ( N a 2 S 2 O 3 ) =0. 1m o l/ L 。
6. 1. 4 過(guò)氧化氫溶液: 吸取 3 0% 過(guò)氧化氫 1 0m L , 加水稀釋至1 0 0m L 。
6. 1. 5 氫氧化鈉溶液: 3 0 0g / L 。
6. 1. 6 淀粉指示液:1 0g / L 。
6. 1. 7 黃色原液:c ( F e C l 3 · 6 H 2 O ) =4 6m g / m L 。
稱取三氯化鐵(F e C l 3 ·6 H 2 O ) 4 6g , 溶于約 9 0 0m L 鹽酸溶液中, 再用此鹽酸溶液稀釋至 10 0 0m L 。標(biāo)定時(shí), 用鹽酸溶液調(diào)整此黃色原液, 使其每毫升含 4 6m g 三氯化鐵( F e C l3 ·6 H 2 O ) 。溶液應(yīng)避光保存, 現(xiàn)用現(xiàn)標(biāo)定。
標(biāo)定: 吸取新配制的三氯化鐵溶液 1 0m L , 加入水 1 5m L 、 碘化鉀 4g 和鹽酸溶液5mL , 立即塞上
瓶蓋避光靜置 1 5m i n , 加入水1 0 0m L , 析出的碘用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至淺黃色, 加淀粉指示液 0.5m L , 繼續(xù)滴定至終點(diǎn)。
注:每毫升0.1m o l / L 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)于 2 7. 0 3m g 三氯化鐵( F e C l 3 ·6 H 2 O ) 。
6. 1. 8 紅色原液:c ( C o C l 2 · 6 H 2 O ) =5 9. 5m g / m L 。
稱取氯化鈷(C o C l 2 ·6 H 2 O ) 6 0g , 溶于約 9 0 0m L 鹽酸溶液中, 再用此鹽酸溶液稀釋至 10 0 0m L 。標(biāo)定時(shí)用鹽酸溶液調(diào)整此紅色原液, 使其每毫升含 5 9.5m g 氯化鈷( C o C l2 · 6 H 2 O ) 。溶液應(yīng)避光保存,現(xiàn)用現(xiàn)標(biāo)定。
標(biāo)定: 吸取新配制的氯化鈷溶液 5.0m L , 加入過(guò)氧化氫溶液 5m L 和氫氧化鈉溶液 1 0m L , 緩緩煮沸1 0m i n , 冷卻。再加碘化鉀 2g 、 硫酸溶液 6 0m L , 立即塞上瓶蓋, 輕輕搖動(dòng), 使沉淀溶解。用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至淺黃色, 加淀粉指示液 0.5m L , 繼續(xù)滴定至溶液呈粉紅色時(shí)為終點(diǎn)。
注:每毫升0.1m o l / L 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)于 2 3. 7 9m g 氯化鈷( C o C l 2 ·6 H 2 O ) 。
6. 1. 9 色澤限度標(biāo)準(zhǔn)溶液: 將黃色原液和紅色原液按 9∶1( 體積比) 混合。
6. 2 分析步驟
稱取試樣 0.7 5g 于2 5m L 具塞比色管中, 加入硫酸1 0m L, 在 9 0℃±1℃ 水浴中加熱 1m i n 后迅速振搖均勻, 繼續(xù)在9 0℃±1℃ 水浴中加熱 1h , 取出,迅速用冰水冷卻。緩緩倒入 1c m 比色皿中, 以水為空白,在波長(zhǎng) 5 0 0n m 下測(cè)定吸光度為 A ; 將色澤限度標(biāo)準(zhǔn)溶液緩緩倒入 1c m 比色皿中, 測(cè)得的吸光度為 A 1 。
6. 3 結(jié)果計(jì)算
易炭化物以吸光度比值 K 表示,按式計(jì)算:
K= A/A 1
式中:
A— — —試樣溶液的吸光度值;
A 1 — — —標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值。
試驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn), 保留1 位小數(shù)。
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的 5% 。
7 硫酸灰分的測(cè)定
7. 1 方法提要
試樣經(jīng)灼燒后, 加硫酸把殘留物轉(zhuǎn)變成硫酸鹽, 高溫下灼燒至質(zhì)量恒定, 即可計(jì)算出試樣中硫酸灰分的值。
7. 2 儀器和設(shè)備
7. 2. 1 干燥器(變色硅膠作干燥劑) 。
7. 2. 2 高溫爐/電爐。
7. 3 試劑和材料
硫酸。
7. 4 分析步驟
稱取試樣 2g , 用電子分析天平精確至 0.0001g , 置于已質(zhì)量恒定的石英或鉑坩堝內(nèi), 緩緩灼燒至完全炭化。放冷,加硫酸 0.5m L~1. 0m L 使其濕潤(rùn), 于電爐上徐徐加熱至硫酸煙霧除盡后, 在 7 0 0 ℃~8 0 0℃ 高溫爐中灼燒至完全灰化。取出, 置于干燥器內(nèi)冷卻, 稱量, 再于7 0 0℃~8 0 0℃ 灼燒, 直至質(zhì)量恒定。
7. 5 計(jì)算
硫酸灰分的質(zhì)量分?jǐn)?shù) w 3 計(jì)算公式：
式中:
m 1 — — —灼燒后坩堝和灰分的質(zhì)量, 單位為克( g ) ;
m 0 — — —質(zhì)量恒定后坩堝的質(zhì)量, 單位為克( g ) ;
m — — —試樣的質(zhì)量, 單位為克( g ) 。
試驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn), 保留2 位小數(shù)。
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于 0.0 0 5% 。
8 硫酸鹽的測(cè)定
8. 1 方法提要
在酸性條件下, 檸檬酸溶液中的硫酸根離子與氯化鋇溶液生成硫酸鋇沉淀, 與同法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液比較, 做限量試驗(yàn)。
8. 2 試劑和材料
8. 2. 1 鹽酸溶液:6m o l/ L 。吸取鹽酸 5 4m L , 稀釋至 1 0 0m L 。
8. 2. 2 氯化鋇溶液:2 5 0g / L 。
8. 2. 3 乙酸溶液:量取 乙酸2 9 8m L , 稀釋至 10 0 0m L 。
8. 2. 4 乙醇溶液:量取無(wú)水乙醇 3 0 0m L , 用水稀釋至 10 0 0m L 。
8. 2. 5 硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液: c ( S O 4 ) =0. 1g / L 。
8. 2. 6 硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 Ⅰ : c ( S O 4 ) =0. 0 1g / L 。吸取硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 1 0m L , 用乙醇溶液稀釋至1 0 0m L 。
8. 2. 7 硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 Ⅱ : c ( S O 4 ) =0. 0 1 5g / L 。吸取硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 1 5m L , 用乙醇溶液稀釋至1 0 0m L 。
8. 3 分析步驟
稱取試樣 1g , 精確到0.0 1g , 即用百分之一電子天平，置于 5 0m L 具塞比色管中, 加水 1 5m L 溶解, 加入氯化鋇溶液 1m L,硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 1m L , 振搖, 靜置1m i n , 加入鹽酸溶液 1m L 和乙酸溶液 0.5m L , 搖勻,靜置 5m i n 。
吸取硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 1 0m L 于5 0m L 具塞比色管中, 加入水5m L , 從“ 加入氯化鋇溶液 1m L ” 開(kāi)始與試樣同樣處理。試樣管的濁度不得深于標(biāo)準(zhǔn)管。
注:無(wú)水檸檬酸用硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅰ ; 一水檸檬酸用硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅱ 。
9 氯化物的測(cè)定
9. 1 方法提要
在酸性條件下, 檸檬酸溶液中的氯離子與硝酸銀溶液生成白色氯化銀沉淀, 與同法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液比較, 做限量試驗(yàn)。
9. 2 試劑和材料
9. 2. 1 硝酸溶液:量取硝酸 1 5 0m L , 稀釋至 10 0 0m L 。
9. 2. 2 硝酸銀溶液:c ( A g NO 3 ) =0. 1m o l/ L 。稱取硝酸銀 1.7g , 溶于水, 稀釋至1 0 0m L , 貯存于棕色瓶。
9. 2. 3 氯化物標(biāo)準(zhǔn)溶液: c ( C l ) = 0. 0 0 5g / L 。吸取0. 1g / L 氯化物標(biāo)準(zhǔn)溶液 5m L , 加水稀釋至1 0 0m L 。
9. 3 分析步驟
稱取試樣1g , 精確到0.0 0 01g , 置于 2 5m L 具塞比色管中, 加水1 5m L 溶解, 加硝酸溶液1m L , 立即加入硝酸銀溶液 1m L , 避光靜置 2m i n 。吸取氯化物標(biāo)準(zhǔn)溶液 1 0m L , 加水 5m L , 從“ 加硝酸溶液1m L ” 開(kāi)始與試樣同樣處理。試樣的濁度不得深于標(biāo)準(zhǔn)管。
1 0 草酸鹽的測(cè)定
1 0. 1 方法提要
在酸性介質(zhì)中鋅與草酸的還原反應(yīng), 生成的乙醛酸與鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙, 而苯肼轉(zhuǎn)化為重氮鹽后與乙醛酸苯腙反應(yīng)生成粉紅色偶氮化合物, 與同法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液比較, 做限量試驗(yàn)。
1 0. 2 試劑和材料
1 0. 2. 1 鹽酸。
1 0. 2. 2 鋅粒。
1 0. 2. 3 鹽酸苯肼溶液: 1 0g / L 。
1 0. 2. 4 鐵氰化鉀溶液: 5 0g / L 。
1 0. 2. 5 草酸標(biāo)準(zhǔn)溶液: 0. 0 1g / L 。稱取草酸( C 2 H 2 O 4 · 2 H 2 O ) 0. 1 7 5g , 用水溶解并稀釋至 5 0 0m L 。吸取該溶液 4m L , 用水稀釋至 1 0 0m L 。
1 0. 3 分析步驟
稱取試樣 0.4g ( 精確到0.0 1g ) 于 2 5m L 具塞比色管中, 加入水4m L、 鹽酸3m L 及鋅粒 1g , 煮沸1m i n , 放置2m i n , 移入盛有 0. 2 5m L 鹽酸苯肼溶液的試管中, 加熱至沸,迅速冷卻, 倒入2 5m L 具塞比色管內(nèi), 加入等體積鹽酸和鐵氰化鉀溶液 0.2 5m L , 振搖, 放置3 0m i n 。取草酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 4m L , 從“ 鹽酸3m L 及鋅粒 1g ” 開(kāi)始與試樣同樣處理。試樣管產(chǎn)生的粉紅色不應(yīng)深于標(biāo)準(zhǔn)管。
1 1 鈣鹽的測(cè)定
1 1. 1 方法提要
在乙酸介質(zhì)中, 微量鈣離子與草酸根離子生成難溶的草酸鈣懸浮體, 與同法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液比較,做限量試驗(yàn)。
1 1. 2 試劑和材料
1 1. 2. 1 乙酸溶液:2m o l/ L 。量取冰乙酸 1 1 8m L , 用水稀釋至 10 0 0m L 。
1 1. 2. 2 草酸銨溶液:4 0g / L 。
1 1. 2. 3 鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液:c ( C a ) =0. 0 1g / L 。稱取于1 0 5 ℃~1 1 0 ℃ 烘至質(zhì)量恒定的碳酸鈣 2. 5g , 加入6m o l/ L 乙酸(量取冰乙酸 3 5 4m L , 用水稀釋至 10 0 0m L ) 1 2m L 溶解, 加水稀釋至10 0 0m L 。吸取該溶液 1m L , 加水稀釋至 1 0 0m L 。
1 1. 3 分析步驟
稱取試樣 0.5g ( 精確至0.0 1g ) , 置于 2 5m L 比色管中, 加水1 5m L 溶解加入草酸銨溶液 1m L和乙酸溶液 1m L , 搖勻,放置 1 5m i n 。取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液 1 0m L 于2 5m L 比色管中, 加水5mL , 從“ 加入草酸銨溶液 1m L ” 開(kāi)始與試樣同樣處理。試樣管的濁度不應(yīng)深于標(biāo)準(zhǔn)管。
