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液相色譜儀流動相的配制與使用說明

時間:2017-6-26 10:09:20      閱讀:2305

液相色譜儀是藥物分析工作者最常使用的儀器之一,本文主要說明液相色譜流動相的配制與使用。

1、恒度洗脫

將水相與有機相混合后、使用混合型過濾膜抽濾,用一個管路(如A管)泵入儀器,這是基本原則。若使用兩個管路(一個純水相、一個純有機相)泵入儀器,極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。

剩余的流動相可繼續使用,需密封后放置于陰涼處,待下次實驗時與新配制的流動相混合后使用。無需擔心發霉、無機鹽析出、揮發、比例不準等問題。

2、梯度洗脫

流動相最為科學的配制方式如下:

(1)A相為高比例水相-低比例有機相,B相為低比例水相-高比例有機相(英國藥典如此規定);

(2)A相為高比例水相-低比例有機相,B相為純有機相。

最不科學的為:A相為純水相、B相為純有機相,這會導致基線漂移嚴重,難以進行穩定的雜質檢測。

梯度洗脫結束后,建議經5min后回到初始狀態,再穩定5min后開始下一測定。這10min的穩定極為關鍵,切勿短時間內回到初始狀態,會對儀器和色譜柱造成損害。一周內,對梯度洗脫進行連續試驗,結果是:第一針與最后一針主成分保留時間相差均小于6s。

引申閱讀:水相中溶質的溶解

水相中需溶解的無機鹽和表面活性劑等固體溶質,建議采用加熱法,不建議采用振搖、超聲等方式。因為振搖、超聲有可能使得溶質處于“臨界膠團濃度”,其后一旦遇到某特殊情形(如遇有機溶劑、溫度劇降等),極易析出結晶,損傷儀器和色譜柱,呈現泵頭處析出“鹽和白粉”的現象。

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