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一、熒光分光光度計(jì)的原理

熒光定量分析多采用工作曲線法，即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按試樣相同方法處理后，配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度和空白溶液的相對(duì)熒光強(qiáng)度，扣除空白值后，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線。然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液，在同一條件下測(cè)定其相對(duì)熒光強(qiáng)度，扣除空白值后，從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。

二、熒光分光光度計(jì)的組成

熒光分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)包括光源、發(fā)射單色器、樣品室、激發(fā)單色器及檢測(cè)器。

1、光源：F98熒光分光光度計(jì)光源為氙弧燈，能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等，故較常用。f96s熒光分光光度計(jì)采用led冷光源。

2、發(fā)射單色器：置于樣品室和檢測(cè)器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。作用是篩選出特定的發(fā)射光譜。

3、樣品室：通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測(cè)量液體時(shí)，光源與檢測(cè)器成直角安排，測(cè)量固體時(shí)，光源與檢測(cè)器成銳角安排。

4、激發(fā)單色器：置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。

5、檢測(cè)器：熒光分光光度計(jì)一般用光電管或光電倍增管作檢測(cè)器。可將光信號(hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)。