一、液相色譜峰前沿的原因和解決辦法

液相色譜峰前沿通常有三個(gè)原因：柱外體積、溶劑效應(yīng)和樣品問(wèn)題。一般過(guò)載的情況我們用通過(guò)降低樣品濃度的方法來(lái)驗(yàn)證，如果低濃度依然前沿，再觀察色譜圖，如果色譜中有很多峰，看各個(gè)峰型是保持一定的前沿程度還是隨時(shí)間前沿峰型有一致的變化趨勢(shì)，如果圖譜中前邊的峰比后邊的峰前沿更厲害，可以考慮柱外效應(yīng)或溶劑效應(yīng)的影響。如果色譜圖中所有峰的前沿程度一致，那么可能是柱床損壞或圖譜中的樣品物質(zhì)性質(zhì)導(dǎo)致。

柱外效應(yīng)導(dǎo)致的峰前沿，我們需要減少儀器系統(tǒng)的死體積，進(jìn)而解決前沿現(xiàn)象。

溶劑效應(yīng)導(dǎo)致的峰前沿，在反相LC中，如使用100%有機(jī)溶劑或100%強(qiáng)溶劑，大體積進(jìn)樣時(shí)，將使色譜峰過(guò)早洗脫出色譜柱，導(dǎo)致峰變形，可以用峰形前沿抑制器來(lái)避免這個(gè)問(wèn)題。在液相色譜中用溶于流動(dòng)相的小體積進(jìn)樣最為理想，或者用流動(dòng)相或與流動(dòng)相極性差不多的溶劑溶解樣品，如果一定要使用強(qiáng)溶劑溶解，那需要減少進(jìn)樣體積。

對(duì)于樣品性質(zhì)導(dǎo)致的峰前沿，可以考慮增加流動(dòng)相中緩沖鹽的濃度，而增加流動(dòng)相中的離子強(qiáng)度，減少因靜電的作用引起的前沿，或者在流動(dòng)相中加適量的四氫呋喃（通常加入的量在5%內(nèi)即可），當(dāng)然升高柱溫也是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。

此外，填料產(chǎn)生的空隙使流動(dòng)相及溶質(zhì)的流速比平均流速移動(dòng)更快，也會(huì)導(dǎo)致峰拖尾或前伸。空隙產(chǎn)生的原因是填充不當(dāng)，或填充柱床塌陷。

二、液相色譜峰前沿的案例分析

C18，流動(dòng)相是水－甲醇（55：45），做出來(lái)的對(duì)照品和樣品峰都前延，怎么辦？

1、查看樣品是否過(guò)載。降低進(jìn)樣濃度，看峰形是否有所改善。一般認(rèn)為峰高在100mAU左右比較合適，不至于因過(guò)載影響峰形。

2、檢查是否是用流動(dòng)相溶解樣品。溶解樣品的溶劑（如純甲醇）洗脫能力比流動(dòng)相強(qiáng)會(huì)發(fā)生峰前延。具體機(jī)理是：正常的峰形應(yīng)該是樣品在色譜柱上均勻的前移的情況下得到的，濃度分布在整個(gè)通過(guò)色譜柱柱床的過(guò)程中任何時(shí)候都呈正態(tài)分布。樣品溶液進(jìn)樣后到達(dá)色譜柱時(shí)間很短，應(yīng)還未被流動(dòng)相充分稀釋，洗脫能力更強(qiáng)的樣品溶劑的局部存在，將使部分樣品被洗脫的速度加快，導(dǎo)致峰前延。

3、增加流動(dòng)相中緩沖鹽的濃度。增加緩沖鹽濃度可以增大流動(dòng)相中的離子強(qiáng)度，減少因靜電的作用（有可能存在于樣品分子之間、也有可能存在于樣品分子與填料表面之間）引起的前延。

4、流動(dòng)相中加入適量的四氫呋喃。往流動(dòng)相中加入少量的四氫呋喃有時(shí)可以改善峰形、增大分離度，很多色譜工作者都知道和使用，但其機(jī)理似乎少人提及。通常所加入的量在5％以內(nèi)即可，需要的時(shí)候可以加入更大的量。