熒光分析法能提供包含激發光譜、發射光譜、發光強度、發光壽命、熒光偏振等信息,是痕量分析領域一種重要的分析方法。本文以棱光F95S熒光分光光度計為例,說明熒光分光光度計測定液體樣品熒光值和繪制熒光光譜曲線的具體步驟。
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一、測定液體狀樣品的熒光值
1、按下儀器總電源開關。
2、主機預熱 30 分鐘。
3、旋轉波長調節旋鈕至所需波長。
4、按“模式”選擇鍵,進入主菜單界面,選擇執行熒光值測定功能。
5、準備樣品:熒光樣品池一盛蒸餾水或去離子水作參比(或試劑空白、參比溶液),熒光樣品池二盛所需測定樣品溶液,分別用試鏡紙將四壁擦拭干凈。
6、靈敏度設定:打開樣品室蓋,樣品池二置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“歸一”調整鍵調節至LCD 液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間,記下此時的靈敏度檔位。
7、調零:打開樣品室蓋,樣品池一置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“調零”調整鍵,儀器自動調整0%,至LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發現 0%有漂移,繼續按下調零調整鍵,直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
8、放入待測樣品:打開樣品室蓋,取出樣品池一,然后把樣品池二放入樣品池座,合上樣品室蓋。
9、讀數:等數值穩定下來之后顯示的數值就是該待測樣品的熒光值,由 LCD 液晶顯示窗讀出儀器測得的樣品熒光值,并記錄。
10、繼續測定其它樣品,或關閉儀器總電源開關。
二、繪制液體狀樣品的熒光光譜曲線
1、按下儀器總電源開關。
2、主機預熱 30 分鐘。
3、旋轉波長調節旋鈕至所需波長。
4、按“模式”選擇鍵,進入主菜單界面,選擇執行熒光值測定功能。
5、準備樣品:熒光樣品池一盛蒸餾水或去離子水作參比(或試劑空白、參比溶液),熒光樣品池二盛所需測定樣品溶液,分別用試鏡紙將四壁擦試干凈。
6、靈敏度設定:打開樣品室蓋,樣品池二置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“歸一”調整鍵,調節至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間,記下此時的靈敏度檔位。
7、調零:打開樣品室蓋,樣品池一置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“調零”調整鍵,儀器自動調整 0%,至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%止。如發現 0%有漂移,繼續按下調零調整鍵,直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
8、放入待測樣品并讀數:打開樣品室蓋,取出樣品池一,然后把樣品池二放入樣品池座,合上樣品室蓋。等數值穩定下來之后顯示的數值就是該待測樣品的熒光值,由 LCD 液晶顯示窗讀出儀器測得的樣品熒光值,并記錄。
9、在要求測量的波長范圍內按所需間隔逐點重復執行上述(7)-(8)步驟,記錄每個波長點及其相應的熒光值。
10、作圖:取一座標紙,X 軸為波長,Y 軸為熒光值,在要求測量的波長范圍內將每一組數據標記在座標紙上,用曲線尺光滑地連接各數據點即可得到待測樣品溶液的熒光光譜曲線圖譜。
11、繼續測定其它樣品,或關閉儀器總電源開關。
(內容來源上海棱光網)