本標準適用于食品中蘇丹紅染料的檢測。

一、方法原理    

樣品經溶劑提取、固相萃取凈化后，用反相高效液相色譜—紫外檢測器進行色譜分析，采用外標法定量。

二、主要儀器設備            

1. 上海儀電分析LC210高效液相色譜儀，帶紫外檢測器

2. FA2004電子天平

3.超聲波水浴

4.旋轉蒸發儀

5.勻漿機

6.離心機

三、試劑

1.乙腈：色譜純

2. 磷酸：分析純 

3. 甲醇：色譜純

4.標準物質：蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅳ；純度≥95%

5.蘇丹紅標準儲備液：準確稱取適量蘇丹紅標準物質，用乙腈配制成10 μg/mL的標準貯備液。

四、操作步驟

1、樣品制備

具體前處理方法參考國家標準GB/T19681-2005。

2、高效液相色譜儀參考條件

色譜柱：C18 4.6 mm(i.d)×250mm，5μm；

梯度程序： 

流動相A: 乙腈 

流動相B: 0.2 % 磷酸水溶液

流速：1 mL/min；

柱溫：40℃

波長：518 nm；

測定：取相同體積試樣制備液和標準使用液分別注入高效液相色譜儀，根據保留時間按定性，外標峰面積法定量。

3、結果計算

試樣中蘇丹紅的殘留量按下式進行計算。

X=C*V/M

  式中：

 X——樣品中蘇丹紅的殘留量，單位為毫克每千克mg/kg；

C——由標準曲線得出的樣液中蘇丹紅的濃度，單位為微克每毫升μg/mL；

V——樣液最終定容體積，單位為毫升mL

M——樣品質量，單位為克g；

4、備注：

參考色譜圖：

2.5 μg/mL蘇丹紅標準混合溶液