一、原理

    在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度呈正相關系。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙酰膽堿）水解。其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計測定吸光度隨時間的變化值，計算抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品是否含有有機磷和氨基甲酸酯類農藥的存在。

二、應用儀器

分光光度計、電子天平、燒杯等

三、分析步驟

1、樣品處理

選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加5ml緩沖液，震蕩1~2min，倒出提取液，靜止3~5min待用。

2、測定

   對照溶液測定：先于試管中加入2..5mi緩沖液，再加入0.1ml酶液，0.1ml顯色劑，搖勻后于37℃放置15min以上（每批樣品的控制時間應一致）。加入0.1ml底物，此時溶液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，記錄反應3分鐘的吸光度變化值ΔA₀

樣品測試：先于試管中加入2..5ml樣品提取液，其它操作與對照溶液測試相同，記錄反應3分鐘的吸光度變化值ΔA_t

3、結果計算

抑制率%＝［(ΔA₀-ΔA_t)/ ΔA₀］×100%

式中：ΔA₀--------對照溶液反應3min吸光值的變化值；

      ΔA_t-------樣品溶液反應3min吸光值的變化值；

4、結果判定

當蔬菜樣品提取液對酶的抑制率≥50%時，表示蔬菜中有有機磷或氨基甲酸酯類農藥存在。抑制率≥50%的樣品需重復檢驗2次以上。

對抑制率≥50%的樣品，可用其它方法進一步確定具體農藥品種和含量。

應用流程圖如下：