概述

色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。

色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成，沒有色譜柱就不能進行分離、定性與定量了，色譜柱是根據柱子里的填充物不同來區別的，填充物又是根據需要分離的物質的極性來選擇的。

一、液相色譜柱的使用方法

1、色譜柱使用前注意事項

色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。

2、流動相

流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純，配流動相的水最好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動相。另外，裝流動相的容器和色譜系統中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。以常規硅膠為基質的鍵合相填料通常的pH值適用范圍是2.0～8.0，BDSC18適合于堿性化合物，pH值適用范圍為2.0～10.0。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時，每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗，并完全置換掉原來所使用的流動相。

3、樣品

樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預處理柱（SPE）對樣品進行預處理；

若樣品不便處理，要使用保護柱，在用正相色譜法分析樣品時，所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。

   液相色譜柱的使用注意事項如下:

1.注意使用的PH范圍,硅膠柱的范圍較窄多為3-8,但耐高壓;基質為聚合物的耐高壓性能不如硅膠柱,但他的PH使用范圍很寬,多為1-14.

2.注意柱子的疏水性能,以免造成柱子的塌陷.

3.注意流動相鹽度,以免損傷儀器.

4.柱子長時間不用以及每次使用前后都要沖洗.

5.要依據樣品的成分選用合適的保護柱.

二、液相色譜柱的安裝

液相柱卡套柱的安裝（不加預柱）

1.將卡套架套入柱芯

2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套

3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片

4.將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手擰緊

5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端

6.連接到液相色譜儀，PEEK接頭手擰即可；若為不銹鋼接頭應使用專用扳手

注意：

使用卡套柱時，兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時候都不能將卡套取下來，否則會造成填料的流失。

卡套柱的安裝（加預柱）：

1.將卡套架套入柱芯；

2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯；

3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片；

4.將“子彈頭”預柱放入卡套片內；

5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手擰緊；

6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端

7．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手擰即可；若為不銹鋼接頭應使用專用扳手更換色譜柱濾網和玻璃棉過濾片（同時可以修補色譜柱）

注意：

在取出反相柱芯的濾網和玻璃片之前，應該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補工具的頭部也應該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網和玻璃棉濾片時帶出柱子內的填料。

三、色譜柱的保存

1、反相色譜柱每天實驗后的保養

使用緩沖液或含鹽的流動相，實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。

2、長期保存色譜柱

如色譜柱要長時間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲存于水（含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞）中，并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上，儲存的溫度最好是室溫。